Bueno, pues seguimos con la siguiente ponencia,
que es al caso de Carlos Vera Fernández
y cuyo título es la expresión génica de receptores de neurotransmisores
del sistema mesocortico límbico tras el consumo de cocaína
y alcohol en ratas.
Creo que voy a hacer la presentación en PDF
porque al tener Mac creo que se modifica.
Creo que va a ser mejor.
¿Dónde es?
Bienvenido a la derecha.
¿Aquí?
Aquí.
Vale, se ve bien, ¿no?
Bueno, gracias por la presentación y buenos días a todos.
Hablar, en primer lugar, sobre el trastorno por uso
de sustancia, que es un problema a nivel de salud pública,
siendo una carga tanto para el individuo a nivel social,
económico, físico y mental,
como para la sociedad.
Podemos explicar la fase de la adicción
como empezando con un inicio del consumo.
Ese consumo se puede volver crónico, creando una dependencia.
Y esto, cuando retiramos la droga,
puede generar síntomas de abstinencia.
Y, a su vez, cuando dejamos de consumir,
esto puede generar una ansia
por volver a consumir esta sustancia,
que denominaremos incubación del craving.
Lo que puede llevarnos a la recaída
y al reinicio de este ciclo.
También decir que uno de los mayores problemas que nos encontramos
y de los problemas más difíciles de resolver de este tipo
de trastorno.
Es el tema de la recaída.
Por ello, en nuestro grupo nosotros nos centramos en estudiar,
y creemos que es importante estudiar,
los mecanismos psicobiológicos
que subyacen esta ansia por volver a consumir la droga,
ese efecto del craving asociado a estímulos
que podrían ayudar a estas personas a salir del laberinto,
como a mí me gusta explicar, que supone esta adicción.
También hablar sobre la prevalencia del uso de sustancia psicoactiva
en nuestro país.
Comenzar diciendo que el 75% de la población española
consumió alcohol el último año en una edad entre 15 y 64 años.
Este mismo dato
con respecto a la cocaína es del 2,3%
y es que somos el sexto país de la Unión Europea
con la tasa de consumo más alta del sexto país.
Además, me gustaría añadir un término, que es el de policonsumo,
que es el uso de dos o más sustancias psicoactivas
en un mismo periodo de tiempo.
Y es que, en el último año, el 39% de la población española
realizó policonsumo.
Y es que este patrón no solo aumenta el riesgo de un mayor consumo,
sino que aumenta la adicción y dificulta los tratamientos.
Y es que el alcohol es la sustancia psicoactiva
que más se consume conjuntamente con la cocaína
y no solo agrava los riesgos del consumo
de estas sustancias por separado,
sino que conjuntamente producen un metabolito tóxico en el hígado
llamado cocaetileno que incrementa los problemas cardiovasculares
e inmunológicos.
Por ello creemos en nuestro grupo que.
Estudiar estas sustancias de manera conjunta es primordial.
Y es que la adicción implica el desequilibrio,
excitación e inhibición en circuitos como el recompensa,
aprendizaje, control inhibitorio.
Y uno de los sistemas clave que se encarga
de mantener este equilibrio excitatorio inhibición
es el sistema glutamatérgico y el sistema galvaérgico
en áreas sensibles a esta difusión neuroquímica asociada a las drogas,
como son el hipocampo, el cuerpo estriado
y la corteza prefrontal.
Para ello.
Nos planteamos el objetivo de analizar la expresión de genes
glutamatérgicos y gabaérgicos mediante QPCR
en estas tres regiones específicas, hipocampo, corteza prefrontal
y cuerpo estriado.
Pero como tenemos tantos resultados significativos,
solo voy a presentar hoy los de hipocampo
y evaluaremos estos cambios tras el consumo de cocaína
y alcohol.
En dos periodos de réplica de drogas, de 2 y 30 días,
y para ello contamos con este diseño experimental,
que es un diseño de autoadministración intravenosa
de acceso extendido de 6 horas,
en el que utilizamos ratas adultas jóvenes,
en el que contamos con tres grupos, grupo salino,
grupo cocaína y grupo cocaína y alcohol.
En primer lugar,
las ratas serán sometidas a un aprendizaje.
Donde, con la presión de una palanca,
recibirá una recompensa, un refuerzo positivo,
que será un pellet.
Tras ello, realizaremos una cirugía donde implantaremos un catéter
en la yugular.
Y tras recuperación de la cirugía, realizaremos las diez sesiones
de autoadministración de acceso extendido, que serán de seis horas.
Y tras ello, la mitad de las ratas estarán dos días de retirada de droga
y la otra mitad, 30 días de retirada de droga.
Tras estos periodos de retirada de drogas,
se hará el test de búsqueda de drogas
y estas ratas serán sacrificadas para el posterior análisis de QPCR.
Ya llegamos a los resultados.
Decidimos estudiar en el sistema glutamatérgico los receptores AMPA,
NMDA y el transportador de glutamato 1.
En cuanto a las unidades del receptor AMPA,
decidimos GRIAA1, GRIAA2.
Y en cuanto al receptor NMDA,
GRIN1, GRIN2A y GRIN2B.
Y en los resultados en macho podemos ver cómo hay una disminución
en la expresión de Y1, GRIN1, GRIN2B y GLT1 respecto
al grupo cocaína y con respecto al grupo salino,
excepto GLT1.
Y es que en la literatura está escrito como el consumo crónico
tanto de alcohol como cocaína por separado,
aumenta la expresión glutamatérgica
y sobre todo en los receptores de NMDA.
Y estamos viendo un comportamiento distinto al consumo
conjunto de estas sustancias.
Además, también vemos cómo hay una disminución a los 30 días
en el grupo de cocaína y alcohol de Green Dose A
y una disminución a los 30 días de retirada de droga en el gen
GRIA2 tras 30 días de abstinencia.
En cuanto a las hembras,
solo encontramos diferencias significativas en el gen GRIN1
y comprobamos un efecto totalmente distinto al que vemos en las hembras
y es el que encontramos en la literatura realmente,
con el consumo por separado de estas sustancias,
pero no solo es que haya diferencias entre sexos,
sino que.
Todos los resultados significativos que vemos en los machos
no los estamos viendo en las hembras.
Es decir, hay diferencias sexuales.
Y desde aquí quería hacer una crítica a todos esos papers
publicados anteriormente que siempre se han hecho estudios en machos
o en machos y hembras conjuntamente, pero nunca se han tenido en cuenta
el grupo hembra que, como podemos ver,
es totalmente distinto el patrón que lleva.
Después, en cuanto a los resultados del sistema GABA-érgico,
hemos estudiado el receptor GABA-A, las subunidades alfa-1,
alfa-2, gamma-2 y la subunidad delta.
En cuanto a macho, vemos cómo hay
una disminución significativa del grupo cocaína,
tanto en las unidades alfa-1, alfa-2 y gamma-2,
con respecto al grupo salino.
Y en la literatura podemos ver cómo el consumo crónico
de esta sustancia de cocaína disminuye la expresión de estos genes
en el hipocampo,
es decir, concuerda con los resultados que nosotros obtenemos.
Además, si nos fijamos en la ratio alfa 1 alfa 2,
vemos cómo hay un mayor, hay un aumento en la subunidad alfa 2
con respecto al alfa 1 tras 30 días de abstinencia.
Y es que se ha descrito
que los animales que presentan sintomatología de estrés,
de ansiedad, presentan una mayor expresión de alfa
2 con respecto al alfa 1.
Esto se concuerda con lo que nosotros observamos
en estos resultados.
Además, en los resultados de la ratio gamma 2 entre delta,
vemos cómo hay un aumento en la expresión de la subunidad delta
y es que en la abstinencia prolongada podemos ver
una mayor inhibición tónica frente a la fásica.
Y esta inhibición tónica
está más relacionada con la subunidad delta.
Y en cuanto a las hembras, pues lo he dicho,
que no hay mucho reportado en la literatura,
pero podemos ver cómo hay un comportamiento distinto
al que encontramos en los machos,
con un aumento en la expresión en el grupo cocaína y alcohol
de las unidades alfa 2 y gamma
2 con respecto al grupo cocaína y un aumento tanto
de gamma 2 como delta con respecto al grupo salino.
Además, en cuanto a las ratios, podemos ver que.
La subunidad alfa 1 y alfa 2 se comporta de manera similar
a como lo veíamos en los machos,
aunque con respecto a la otra ratio no podemos decir lo mismo.
Y a modo de conclusión,
decir que hay una disminución en la expresión de los machos
en el grupo cocaína con respecto al salino
y al grupo cocaína de gría 1, green 2B y GLT1,
el transportador GLT1, podemos decir que hay una disminución,
hay una caída de este sistema glutamatérgico
que no podemos ver en las hembras.
Como podemos ver, hay un aumento de Green 2A.
Y en cuanto al sistema gabaérgico, en el hipocampo
podemos decir que hay una disminución de esta expresión de estos genes,
es decir, hay una disminución de la inhibición sináptica
en los machos que no encontramos en las hembras,
en el grupo cocaína y alcohol.
Y. Muchas gracias a todos por escucharme.
Muchas gracias, Carlos, por la presentación.
¿Alguna pregunta en la sala?
Quería preguntarte,
por lo que he visto más o menos en los gráficos,
parece ser que hay más variabilidad en los resultados con las hembras
respecto a los machos.
¿Eso podría ser debido al ciclo estral?
Porque me imagino que no lo habéis medido.
No lo hemos medido,
pero seguramente haya implicado muchas hormonas sexuales
y es que no solo encontramos diferencias significativas
en la expresión de genes.
Anteriormente hemos medido el comportamiento,
tanto ese efecto del craving, esa incubación del craving,
como el consumo que tienen estos animales
y se comportan totalmente distintos en el tema de la recaída.
Tanto machos como hembras.
Tengo la gráfica preparada.
Lo mítico.
Y vemos como el consumo es mayor en el grupo cocaína
que en el grupo cocaína y alcohol.
De forma general, tanto en machos como hembras,
pero en el grupo cocaína sí se ve esa incubación del craving
tanto en machos como hembras,
pero en el grupo cocaína y alcohol solo
lo observamos en las hembras.
Es decir, ya desde el comportamiento estamos viendo que son distintos.
Por eso nosotros hemos decidido,
porque este es el trabajo de la tesis de mi compañera Lucía,
realizar toda la estadística por separado.
No sé.
Sí, Carlos, enhorabuena.
Te escucho, ¿eh?
Te escucho perfectamente.
Hay que apagar el micrófono anterior para que la cámara funcione, ¿vale?
O sea, apágase y la salve.
Eso es.
Y así las cámaras no se mueven adecuadamente.
Bueno, Carlos, enhorabuena.
Muchas gracias por la presentación.
No te preocupes que no te voy a poner en ningún aprieto, ¿vale?
Bueno, me alegra que hayas puesto la gráfica
porque es lo primero que te iba a preguntar.
No se puede contextualizar tus resultados
si no pones esto.
O sea, que esto es fundamental.
Bien.
¿Te has planteado luego o vais a hacer Western Blocks?
Pues que es fundamental.
Pero a ver si.
Sobre todo por los receptores AMPA.
Fíjate que yo se lo he propuesto a mi director de tesis,
pero creemos que vamos a hacer ELISA en algunos que nos interesen más.
Pero Western Blood no se fía mucho.
Pero bueno, sería una buena opción.
Mira, es que con la incubación del craving está descrito
que hay una inserción de receptores
AMPA que les falta la subunidad a gloados.
Y porque esos tienen características diferentes en el flujo iónico,
son canales de rectificación interna.
Entonces, hay una técnica que os va a permitir mirar un poco mejor
si la internalización de los receptores AMPA o.
Bueno, de la subunidad, si están internalizadas o no.
Y yo creo que para contextualizar esos resultados,
y es una técnica fácil, no es muy difícil, es fundamental.
Entonces, sobre todo por los receptores,
por las unidades gloados de los receptores AMPA,
que está súper relacionada con la ecuación del Kevin,
al menos en el núcleo accumbens y en el estriado.
Y la segunda pregunta que te quería hacer es si esto lo relacionáis
de alguna manera con la plasticidad en el hipocampo,
porque tú mismo alguna vez me has preguntado, bueno,
pero el hipocampo, cómo lo relacionamos con el circuito
de la recompensa y tal.
No sé si esto lo habéis dado alguna vuelta más.
Y si vais a medir los niveles de los aminoácidos como tal.
Seguramente a lo mejor ya hasta lo tenéis hecho, ¿no?
De hecho, hay un póster magnífico que va a presentar Enrique,
donde se ven los niveles en el hipocampo.
Y con respecto a los niveles de glutamato,
se ve cómo hay una reducción.
El patrón de la mayoría de los aminoácidos tiene
como una expresión a la alta, hay una mayor concentración,
pero justo con el glutamato se ve una disminución.
Pero claro, no es tan específico como puede ser un western blood,
que está viendo la expresión de una proteína específica.
O sea, es glutamato a nivel general.
Gracias, aquí.
¿Alguna pregunta más?
Yo tengo una pregunta.
Dado que esos dos sistemas están muy relacionados,
el glutamatógico y el gabaórgico,
¿habéis buscado si hay algún tipo de interacción o coregulación?
Y eso a lo mejor es simplemente hacer alguna correlación
entre la expresión de dos distintos tipos de genes.
Sí, sí.
La correlación
todavía no la hemos hecho entre esos dos sistemas
y si hemos realizado la correlación respecto a la conducta,
pero no nos sale ninguna correlación que nos haya gustado.
Pero sí, sería interesante entre los dos sistemas.
Yo lo digo también para unificar los dos resultados que son
como de dos sistemas distintas.
Sí, también hemos, vamos, que esto es muy reciente,
lo hemos realizado hace dos semanas,
También tenemos los resultados del sistema endocannabinoide,
pero bueno,
creo que eso estaría bien exponerlo en el Congreso del SEIC.
Vale, yo tengo una pregunta muy sencilla
que me ha causado curiosidad.
¿Por qué no habéis incluido al grupo alcohol solamente?
Pues está control, cocaína, cocaína, alcohol, bueno.
Es la pregunta que más nos hacen.
Y bueno, es que al ser un diseño de autoadministración intravenosa,
el alcohol es bastante aversivo y no consumen el alcohol,
no pulsan la palanca para recibir el alcohol.
Habría que buscar otra manera,
como ya las hay y está descrito que hay cucharas donde con el pulso
de la palanca pueden optar a beber.
Pero sí, es la pregunta típica que nos hace.
Pero intravenoso el problema sobre todo es eso,
que no pulsa en la palanca porque no le gusta.
Gracias.
Pues el sistema agravérgico,
el alcohol tiene unos efectos bastante fuertes.
Entonces, ¿cómo se puede hipotetizar
que serían solamente los efectos del alcohol en este sistema agravérgico
sin la cocaína?
Sería muy interesante poder comparar entre ellos.
Sí, totalmente de acuerdo.
Vale.
Gracias, Carlos.