Hoy os vengo a presentar lo que sería el primer experimento piloto
de lo que será mi futura tesis sobre el estudio
de la implicación de la microglía en la adicción a la cocaína.
Por daros un pequeño background, sí que me gustaría comentar
que el consumo de la cocaína en polvo entre personas de entre 15 y 64 años
ha alcanzado el máximo registrado en la serie histórica,
según la encuesta de edades del año 2024.
Lo que sí que nos parece bastante preocupante
es que las intervenciones psicológicas y farmacológicas
son bastante limitadas
y es fundamental desarrollar nuevas estrategias terapéuticas.
Para ello creemos que es clave comprender a fondo
los mecanismos psicobiológicos que están implicados
en la adicción a la cocaína.
Lo que sí que sabemos es que tras primeros consumos
hay una serie de cambios neuroplásticos en zonas
asociadas al circuito de recompensa.
Y también sabemos que para la mayoría de las personas el consumo de cocaína
se va a limitar a unos contactos iniciales,
pero en un subconjunto de la población
sí que se va a desarrollar una adicción a la cocaína,
un trastorno por consumo de sustancias,
como dice el DSM.
Y sabemos que la aparición de esta psicopatología
lo que implica son.
Digamos, alteraciones progresivas en zonas prefrontales, límbicas
y de estriado y también cambios en sistemas de neurotransmisor
como pueden ser el gabaérgico, el glutamatérgico
o el dopaminérgico.
Entonces, en los últimos años se ha empezado a investigar el papel
de la microglía como un posible mediador
más de estos cambios.
Entonces, la mayoría de estudios que se han hecho en animales
se han centrado solo en el efecto placentero de la cocaína
y no tanto en el desarrollo de una adicción.
Entonces, nosotros a la hora de sentarnos e intentar ver un poco
cómo empezar a ver esto, el primer paso,
nos quedamos con cuál iba a ser nuestro primer paso y en este caso,
Es sí que el encontrar o la necesidad de tener modelos
animales más sofisticados.
En este caso, necesitamos modelos animales que emulen, digamos,
las características cardinales del trastorno adicional a cocaína,
estas características que explica el DSM.
Y para ello hemos utilizado el modelo
de los tres criterios de David Belan,
que nos va a permitir identificar animales que desarrollen
conducta similar a la adicción, evaluando estos tres criterios,
que serían la dificultad para detener el consumo de la droga,
limitar la ingesta, la alta motivación
por tomar la droga, y luego el consumo compulsivo,
que en este caso sería el consumo de la sustancia
a pesar de sus consecuencias perjudiciales.
Puesto en marcha todo el protocolo de autoadministración y demás,
será categorizar a los animales como positivos,
como que cumplen un criterio, a los animales que estén en el 40%
de los valores más altos de la distribución.
Entonces, en el experimento que estamos realizando ahora mismo,
hemos aplicado un protocolo de autoadministración intravenosa
de cocaína, en este caso la dosis es de 0,8 miligramos kilogramos,
en ratas machos, praga y dauli.
Durante 40 días.
El programa ha comenzado con una razón fija 1
durante 5 o 10 días para que las ratas
sí que puedan aprender a discriminarla entre palanca activa
e inactiva.
Luego son dos días de FR3 y ya el resto de las sesiones
van a ser en FR5.
Las sesiones constan de 1 hora y 20 de tiempo
y están divididas en 5 bloques.
Son 3 periodos con droga y 2 periodos sin.
Los 3 periodos con droga están señalizados
con la luz de ambiente encendida y los 2 periodos
de no droga están señalizados con la luz de ambiente apagada.
En el caso de los periodos con droga,
sí que en el momento en el que el animal cumpla el FR
va a haber un periodo de 40 segundos de time out
en los que no van a poder recibir infusión pese a que pulsen la palanca
y eso lo señalizaremos con la luz de palanca activada.
Que veis, bueno, la luz que se vería ahí pequeñita.
Para el primer criterio,
para la dificultad para detener el consumo de la sustancia,
lo que nos van a interesar son los periodos de no droga.
En estos periodos
lo que vamos a hacer es cuantificar la presión de palanca
que haya y lo haremos en las sesiones 37, 38 y 39
de lo que sería todo el programa.
Después,
para evaluar la alta motivación para tomar la droga,
lo que vamos a hacer es un programa de razón variable.
En este caso, lo que vamos a hacer es someter al animal
a un programa de razón variable
y vamos a evaluar cuánto están dispuestos a trabajar
para obtener las infusiones de droga.
Calcularemos el breakpoint, lo haremos en la sesión 32,
y a priori el programa dura 5 horas, Pero si el animal no consigue llegar
en una hora al FR establecido en ese momento,
el programa se cortaría.
Y luego, para el consumo de sustancias,
a pesar de las consecuencias perjudiciales
para este consumo compulsivo,
lo que vamos a hacer es, en la sesión 40,
vamos a hacer sesiones con shock eléctrico
en las que meteremos al animal en la.
En la caja de autoadministración estará durante 40 minutos,
encenderemos la luz de señalización de disponibilidad de la droga
y en el momento en el que el animal pulse un FR1 emitiremos un sonido
con un clicker que funcionará como estímulo discriminativo
de la descarga.
En el momento en el que el animal llega al FR4
aplicaremos una descarga de 0,4 mA durante 2 segundos
y en el momento en el que complete el FR5 será una descarga de 0,8 mA
durante 2 segundos más la infusión de cocaína.
En el momento en el que complete el FR5 entrará en periodo
de 40 segundos y volverá a resetearse el programa
y volverá a empezar desde el principio.
También se reseteará en el momento en el que el cambio de FR
del animal tarde más de un minuto.
Los resultados preliminares que estamos obteniendo ahora mismo,
porque estamos ahora mismo en la sesión 30,
hemos querido enseñaros las pulsaciones totales
en los periodos con acceso a droga.
En este caso lo que haríamos sería sumar los tres periodos con droga
y hemos sacado las pulsaciones tanto activas
como inactivas y lo que hemos hecho son anovas de media repetidas
en los distintos FRs.
En el FR1 lo que hemos encontrado a nivel intrasujeto
es que sí que hay una diferencia entre las pulsaciones tanto de machos
como de hembras, tanto en palanca activa
como inactiva a lo largo de las sesiones
y luego también hemos visto que sí que hay diferencias significativas
entre las pulsaciones activas e inactivas.
Luego además en el intrasujeto, en el FR1 sí que hemos visto
que las hembras consumen más cocaína que los machos,
están pulsando más veces la palanca activa
que los machos.
Luego en el FR3 tuvimos una triple interacción,
en este caso lo que vimos fue que los machos en la sesión 14
pulsaban más la palanca activa que la inactiva y en la sesión 15
la pulsaban todavía más y las hembras pulsaban más
en la sesión 14 la palanca activa que la inactiva,
más la activa que la inactiva y en la sesión 15
sí que estaban pulsando menos.
Y luego en el FR5 lo que vimos fue únicamente diferencias
entre palanca activa e inactiva, tanto machos como hembras
pulsaban más la activa que la inactiva.
Luego también os hemos querido traer las pulsaciones totales
del primer periodo con droga,
o sea, de los tres periodos con droga,
os he enseñado el completo,
pues en este caso solo sería el primer periodo.
En este primer periodo las únicas diferencias
que encontramos fue en el FR1, donde sí que vimos
que había más pulsaciones a lo largo de las sesiones
y también vimos que las hembras en este primer periodo con droga
pulsaban más la palanca activa que los machos,
es decir, que recibían más infusiones.
Luego os hemos querido también traer las pulsaciones totales
del primer periodo de no droga, en este caso en óptimos resultados,
pero para el primer criterio,
cuando seleccionemos en la sesión 37, 38 y 39,
lo que haremos será seleccionar las pulsaciones del primer periodo
de no droga para evaluar qué animales estarán dentro del primer criterio
o no.
En este caso lo hemos hecho
con las tres últimas sesiones que hemos hecho
y lo que hemos obtenido es que tenemos tres machos
y tres hembras que cumplen el primer criterio.
Como conclusiones, sí que comentaros que en pulsaciones totales
en los periodos con acceso a droga en el FR1
las respuestas de palanca activa e inactiva
aumentan en el tiempo.
Además,
las respuestas a la palanca activa aumentan significativamente,
lo que indica un proceso de aprendizaje dirigido
y no hemos encontrado diferencias de sexo.
En las pulsaciones totales, en los periodos con acceso a droga,
sí que hay diferencias significativas entre las sesiones 14 y 15
y se llevan a factores de presiones de palanca y sexo.
Y, a pesar de no haber habido diferencias
estadísticamente significativas entre macho y hembra,
sí que hemos visto que hay una tendencia de las hembras
a bajar en presiones de palanca activa.
Luego, en las pulsaciones totales en los periodos con acceso a droga,
en el FR5, las respuestas de palanca sí que aumentan significativamente,
mientras que las de palanca inactiva se mantienen en el tiempo,
con lo cual sí que se está instaurando ese aprendizaje.
Luego, vimos que durante la fase de adquisición el consumo de cocaína
de las hembras fue mayor en comparación con los machos
y, además, observamos que este consumo
especialmente se daba durante el primer periodo de acceso
a droga.
Y luego, por último, mencionar que si tomamos como referencia el 40%
de los valores más altos de la distribución,
lo que os comentaba, para seleccionar estos animales,
en nuestro caso seis animales,
en este caso tres machos y tres hembras,
cumplen con el primer criterio del modelo.
Y, bueno, como no tengo foto con mi grupo,
sí que quería dar las gracias a mi PEA, Alejandro,
por hacer posible que yo esté haciendo esta tesis,
a mi grupo, por supuesto a Jairo,
a Hitor y a Natalia y a todo el Departamento de Psicobiología
por el apoyo de todos los días.
No me queda muy claro, a ver, lo de las hembras,
o sea, el dato de las hembras,
que al principio tienden a tener una tendencia menor,
o sea, dan menos a la palanca y luego al final los datos
que muestras son al contrario,
que muestras un aumento en la presión de palanca,
no sé si es ya en FR3 o.
Lo tienes hasta en las conclusiones.
Sí, sí, sí, sí.
O sea, lo que yo,
a lo mejor no me he explicado bien, pero vamos,
en el FR1 sí que están pulsando más la palanca activa que los machos,
están recibiendo más infusiones y luego la cosa es que sí
que se nivelan con los machos.
Es decir, en el FR3 no sabemos muy bien por qué.
Pero no se nivelan exactamente, tienen mucha más, ¿no?
Tienen, claro, es como ellas vienen del FR1,
en el momento
en el que entran en el FR3 suben, como sería de esperar,
y lo que no entendemos muy bien es por qué luego bajan.
O sea, es como que pegan un bajón de palancas
y luego ya sí que en el FR-5 sí
que se ponen a la par con los machos.
Los machos, por ejemplo, sí que lo hacen de recorrido,
es decir, llegan pulsando un poquito más en el FR-3 que en el FR-1,
pero en la segunda sesión de FR-3 sí que pulsan más.
Vale, ¿no habéis mirado otros comportamientos?
¿Sólo estáis buscando la o sea, sólo estáis haciendo.
16.
¿16 machos y 16?
8 hembras y 8 machos.
Ah, 8 y 8.
Vale.
¿Y ahí no tenéis diferencias de, digamos,
unos que se dan claramente más y otros que se dan claramente menos?
No, que hayamos mirado todavía no.
Vale.
Yo te quería preguntar una cosa, Pedro,
porque las células de glía han sido las grandes
ignoradas en el estudio del sistema nervioso.
Cuéntanos un poco, porque seguro que habrás leído
toda la literatura sobre el tema, ¿qué esperáis encontrar
en la microglía en relación con la adición a la duvaina?
Lo que sí que yo creo que nos gustaría ver,
la idea de esto es en el momento en el que tengamos ya
seleccionados los animales, sí que miraremos marcadores proteicos
y miraremos ciertas teitoquinas inflamatorias que nos revelen
que sí que hay una actividad de la microglía.
Y la idea es, como todos los cambios neuroplásticos que hay por culpa
de la adicción en las áreas relacionadas
con el circuito de recompensa y demás,
ver si la microglía, por ejemplo, está participando a lo mejor
en toda esa neuroplasticidad.
Entonces, eso es un poco lo que esperamos ver.
La idea de este primer experimento yo creo que es
como encontrar si la microglía sí se ve que está funcionando más
de lo habitual y luego sí que nos gustaría ver
en qué áreas.
Y hay fórmulas terapéuticas de intervención
para poder afectar al metabolismo, como se denomine,
al funcionamiento de la microglía.
¿Hay fórmulas para químicas?
No tengo ningún conocimiento sobre esto.
Que yo haya leído, no.
Pero vamos, seguramente.
Yo creo que todavía me queda muchísimo por leer de esto
y.
Seguramente haya,
pero ya te digo que ahora mismo que yo haya leído o no.
Te iré preguntando por los pasillos cuando te vea
porque es un tema que me interesa.
¿Alguna pregunta más en la sala?
Te voy a preguntar yo otra cosa.
¿Cuántas sesiones te quedan?
Vamos por la 30, me quedan 10.
O sea, a la sesión 40 ya vais a seleccionar,
o sea, y ahora tenéis ahora mismo como la mitad, ¿no?
El 50%.
O sea, la cosa, claro,
es que tampoco es como lo que va a ser en un futuro,
o sea, no es lo real, porque nosotros lo que hemos hecho
para enseñaros un poco cómo haríamos lo del primer criterio,
lo hemos hecho con las tres últimas sesiones,
pero van a ser la 37, 38 y 39.
Que son las claves para luego elegir.
Claro, o sea, me quedaría la del jueves, que es la 32,
la del programa Razón Progresiva,
luego me quedaría la 40, que es la de castigo,
y las tres últimas, que son para el primer criterio.
Justo es porque no me di cuenta, pero quería preguntarte justo
en la sección de castigo comentaste algo de un minuto
y no me quedó claro qué es lo que querías decir.
Sí, es como en el momento en el que el animal,
por ejemplo, imagínate, empieza un FR1,
si entre el FR1 y el FR2 pasa más de un minuto,
volvería a resetearse el programa.
O sea, solo se resetearía una vez cumpla el FR5,
entraría en timeout y sí que se resetearía
y volvería a empezar.
O en el momento en el que el.
Haya más de un minuto entre cada FR
y de FR5 entonces se bajaría a FR4 no a 1, no, se bajaría
y volvería a empezar en FR1 es decir,
en el FR5 recibiría el shock y la infusión,
entraría en timeout y ahí en el timeout
se apagaría la luz de ambiente estaría con la luz de palanca
y demás y se volvería a encender la luz de ambiente
indicando disponibilidad de la droga y en el momento en el que pulse
el FR1 sonaría otra vez el clicker y otra vez a empezar.
No es que vaya a hacer una pregunta, Pedro.
Es por una cosa que ha preguntado el profesor Montoro.
Hay algunas cosas para modular la microglía.
De hecho, hay un antibiótico que es
una tetraciclina, que es la minociclina,
que tiene como efecto la depresión temporal de la microglía
y se utiliza.
Yo soy muy crítico con la minociclina
porque es muy sucia como herramienta para modular el sistema nervioso
y tiene muchísimos efectos secundarios.
No creo que se pueda pensar,
aunque se han hecho estudios de dar minociclina
a las personas que tienen un trastorno por adicción.
Pero como herramienta para modularlo, sí.
Antes se utilizaba más, ahora menos.
Y luego hay algunas herramientas experimentales que son antagonistas
del factor estimulante de colonias, que es lo que favorece la microglía,
pero que eso no se utiliza en seres humanos.
Pero bueno,
por complementar lo que ha dicho Pedro, que sí que hay alguna cosa,
pero que no creo que tenga vistas ahora mismo de utilizarse.
Yo creo que cuando se mejore la terapia génica
y podamos utilizar estrategias mucho más finas,
que eso sí lo veo plausible, se explorará esta cuestión.