Bienvenidos a esta clase de vacunas de segunda generación,
frente al coronavirus Chase dos los coronavirus;
son virus a con un genoma de unos 30.000 núcleo activos,
los más grandes, entre todos los virus herreña,
conocidos, que se asocia a la núcleo proteína
y que está protegido dentro de una envuelta
en la que se integran varias proteínas estructurales,
la proteína de la envuelta, la proteína de membrana
y la proteína ese que forma las especulés que dan.
El aspecto de corona característico
de los coronavirus, la proteína de la especula es la responsable
de la unión al receptor celular, y, por tanto,
de mediar la entrada del virus en la célula para infectar.
La infección es también la principal inductora de anticuerpos.
Neutralizan des.
Por esta razón
es la principal protagonista en el desarrollo de vacunas.
La respuesta inmune
frente al coronavirus es una respuesta compleja,
que incluyen varios elementos.
Por una parte, los anticuerpos neutralizan des que se dirigen
frente a la proteína
de la especula y que impiden la unión del virus al receptor celular
y, por tanto, que comience la infección.
Además, existe una respuesta celular que incluye linfocitos
de cito, tóxicos, que destruyen las células, que ya se han infectado
y que protegen fundamentalmente de la infección severa
y, por otra parte, están los linfocitos de memoria.
Son la memoria inmunológicas, que permite dar una respuesta rápida
y muy efectiva frente a una nueva infección,
porque hay un recuerdo de infecciones previas
o de la vacunación previa.
Aunque los correlatos de protección frente al saco coronavirus dos
no se conocen completamente,
sí que hay información sobre cómo es la respuesta inmune
protectora en pacientes de esas dos que se han recuperado.
Se ha observado que prácticamente todos los pacientes
recuperados incluyen anticuerpos neutralizan des frente a la proteína
de la especula.
Veis o tipo y ggg o igea.
Existe además, una respuesta de células, de también específica,
de la proteína de la especula.
Pero además hay una respuesta celular
dirigida frente a otras proteínas del virus,
la proteína de membrana, la núcleo proteína,
o incluso proteínas no estructurales del complejo,
de las réplicas, lo que indica que, además de la proteína
de la especula, otras proteínas virales.
Son importantes en el desarrollo de una inmunidad completa y protectora,
y esto es algo que hay que tener presente en el desarrollo de vacunas
mejoradas?
.
Se han desarrollado distintas estrategias
para el desarrollo de vacunas frente a esas 2,
siguiendo distintas tecnologías, la más sencilla de todas.
Utiliza metodologías convencionales,
como la activación de virus.
Estas virus sin activados tienen algunas limitaciones
en cuanto a la efectividad en la protección
y también pueden tener problemas de seguridad.
Si la inactiva acción no es completa,
sin embargo es una forma muy económica y muy sencilla
de desarrollar vacunas.
Sin embargo, la se la gran parte de las vacunas
que se han desarrollado, se han hecho por medio de la biotecnología
que permite expresar bien la proteína de la especula,
o bien, utilizar ácidos nucleidos que llevan la información
para expresar esta proteína en el individuo vacunado.
Por una parte, se han producido vacunas,
que expresan proteína ese recombinante estas vacunas.
Su comunidad son sencillas de producir, con un coste reducido,
son también sencillas de transportar y de almacenar,
porque no tienen un requerimiento de temperaturas muy bajas,
y suelen tener ciertas limitaciones en cuanto a la efectividad.
De ahí la necesidad de combinarlas coadyuvantes,
que potencien la respuesta inmune otras vacunas,
utilizan ácidos nucleidos,
bien DNA o herreña,
que codifican la proteína.
De la especula.
Algunas de ellas son vectores virales,
fundamentalmente adenovirus,
que actúan como vehículos portadores del adn,
que codifica la proteína de la especula
estos vehículos no se replican en el interior de las células
y están atenuados de forma que dirigen la expresión
de la proteína.
Ese en aquellas células en las que el vector viral ha entrado
y sin duda la estrategia más innovadora
y más revolucionaria en esta pandemia ha sido la de las vacunas de rne,
a mensajero, que incluyen moléculas de reniega mensajero,
que codifican la proteína de la especula.
Esta es la mínima información necesaria
para que se produzca en el interior de la célula,
la proteína.
Ese, el erróneo,
está protegido por nanopartículas y víricas que actúan de vehículo
para internalizar el rne dentro de la célula en en general,
las vacunas actuales.
Frente a esas dos son muy efectivas, sobre todo,
protegiendo frente a la enfermedad severa, y la muerte, sin embargo,
solo protegen parcialmente frente a la infección,
con lo cual no impiden la transmisión del virus
y la circulación del virus.
Este sería uno de los aspectos que se podrían mejorar
en el desarrollo de nuevas vacunas.
Las vacunas.
De reunia mensajero, que como decía son
una de las estrategias más innovadoras que se han aplicado,
se construyen mediante un procedimiento de síntesis química.
En ausencia de células, se utiliza el adn con la información
de la proteína de la especula como molde que,
se transcribe utilizando la polimerasa del fago, de 7,
en una reacción de transcripción in vitro
para dar lugar al errónea mensajero de la proteína de la especulan,
este a hay que formularlo con polímeros que lo envuelven
y lo protegen de la degradación y que actúan a su vez de vehículo
para introducirlo en el interior de las células.
Una vez administrado, el errónea dentro de las células,
se va a traducir utilizando la maquinaria de traducción celular,
para dar lugar a la proteína de la especula,
que induce, la respuesta inmune de anticuerpos
y también la respuesta celular, las vacunas de reniega.
Tienen importantes ventajas, por una parte, la seguridad, la rn,
no puede integrarse en el genoma adn de los individuos,
por lo tanto no existe riesgo potencial.
De muta génesis es biodegradable.
Es decir, el herreña es una molécula
que se degradan rápidamente, con rne,
asas que están en el interior de la célula
y también en el exterior,
con lo cual su vida media es corta y, por tanto,
esto disminuye.
El riesgo de toxicidad
por sobre expresión de la proteína de la especula
-la están formadas por un número muy definido de componentes químicos,
lo que desde el punto de vista de las agencias reguladoras
facilita la autorización para mejorar su eficacia es necesario
optimizar la estabilidad del reunión y también su traducción.
Para ello se utilizan distintas alternativas,
como la incorporación de modificaciones químicas en él errónea
o la incorporación de secuencias reguladoras,
por otra parte,
para la administración del reniega en el interior de la célula.
Es necesario utilizar una formulación de con compuestos químicos
que actúan como vehículo
normalmente son polímeros que forman nanopartículas, como se ha visto.
Durante la pandemia es posible la producción a gran escala
de estas vacunas.
Sin embargo, tienen la limitación del alto coste de producción
y de que requieren para su conservación
y para su distribución utilizar temperaturas
de menos -70 menos -80º.
grados.
Por lo tanto, serían bienvenidas, nuevas cambios en el desarrollo
de estas vacunas que disminuyera su coste
y que simplificará la conservación y la distribución de estas vacunas.
Además de estas vacunas de rne,
a mensajero, sintético no réplica activo,
que son las que están autorizadas frente a esas dos
los herreñas, autos, replica activos derivados de virus
representan una nueva generación de vacunas de rn
a que han incorporado en los digamos las adaptaciones que el virus
que los virus han adquirido en la evolución en cuanto a mejora
en su replicación en la expresión génica,
en la evasión de la respuesta inmune innata en esta clase.
Hablaremos de el trabajo que estamos desarrollando
en el laboratorio de coronavirus del Centro Nacional de Biotecnología
en el desarrollo de vacunas de erróneas autos,
réplica activos frente al sars coronavirus 2;
en nuestro laboratorio de coronavirus llevamos más de 35 años
estudiando los mecanismos de pato génesis de los coronavirus.
Por una parte, estamos interesados en identificar
cuáles son los factores de virulencia del virus,
porque la elección del genoma de estos genes de virulencia conduce
a virus, que están atenuados, que son en principio candidatos a vacuna.
Por otra parte, la identificación de las rutas celulares
implicadas en pato génesis da lugar
a a identificar dianas posibles de antivirales;
el trabajo con con virus humanos, altamente patógeno,
picos como algunos coronavirus requiere trabajar
en condiciones de laboratorios y con protocolos de bioseguridad
el nivel 3,
como lo que se muestra en esta imagen durante este tiempo,
en nuestro laboratorio hemos desarrollado dos herramientas
que son fundamentales para el desarrollo
de estos proyectos.
Por una parte,
la tecnología para construir un clon incentivo ceremonia,
esto es una copia en forma de adn del genoma completo
del virus que es genoma rm, a de forma que está copia
en cómo adn permite modificar el genoma en el laboratorio
utilizando técnicas convencionales de biología molecular.
Nuestro laboratorio fue el primero en desarrollar en el año 2000
un plan incentivo para un coronavirus;
en aquel momento era un desafío, debido al enorme tamaño
que tienen los coronavirus y a la presencia de regiones
del genoma, que son tóxicas
cuando se quiere amplificar este adn en bacterias.
Por otra parte, se han desarrollado modelos animales
pequeños de ratón que reproduce la enfermedad,
que se observa en humanos y que permiten evaluar
la protección de las vacunas y la eficacia de los antivirales.
Rescatamos virus recombinantes a partir del infectiva,
que se construye ensamblando, fragmentos sintéticos de adn
se van uniendo ordenadamente hasta hacer una copia
de longitud completa del genoma del virus;
este ceden efectivo se introducen cromosomas artificiales
de bacterias que permiten amplificarlos en bacterias
y se trans, feta en células de manijero,
donde la herreña polimerasa celular transcribe el DNA
en un errónea, que es idéntico al genoma del virus
y que, por tanto, inicia en la célula el ciclo de infección
y de replicación como si fuera un virus,
con lo cual da lugar a la formación de virus recombinantes,
que son inefectivos y que son idénticos
al virus original.
Se han construido también ratones, humanizados,
que están modificados genéticamente para expresar el receptor humano
del virus que desarrollan.
Una infección pulmonar signos de enfermedad respiratoria,
la patología inflamatoria característica de los coronavirus,
y, finalmente, la muerte.
En los últimos años hemos trabajado en el desarrollo
de replico en este rm,
a como candidatos a vacuna frente a coronavirus,
y este trabajo es la prueba de concepto
para el desarrollo de la.
Una que estamos haciendo frente al coronavirus chas dos
se han desarrollado, replican es errónea,
del coronavirus de Oriente Próximo,
es un coronavirus que todavía sí activo en Oriente Próximo,
con una alta mortalidad del 30 por 100,
aunque su transmisión entre humanos está limitada,
pero todavía representa una amenaza para la salud pública estos replicó,
han es erróneas, se han generado utilizando el sistema de genética
reversa y eliminando el gen de la envuelta
como consecuencia de la elección de este pequeño gent,
se obtienen.
Replicó en ese rm
a que son deficientes en propagación.
Esto significa que el virus sin el gen,
cuando se se pasa en cultivos celulares,
va perdiéndose a lo largo de los pases,
es decir, no tiene capacidad para propagarse,
a diferencia de lo que sucede con el virus completo,
o ahí está el que tiene un crecimiento continuado
y que continúa replicando ese.
Mientras haya células vivas.
Cuando se proporciona en trans
la proteína que le falta al al virus de eficiente en propagación
se recupera parcialmente la capacidad de propagación del virus,
pero además esto replicó dones,
conservan la capacidad de replicarse en el interior de la célula,
como muestran las columnas de color rojo,
en las que se analizan la cantidad de reniega viral, bien genómico,
bien de un rm, a su genómico del virus
con niveles que son similares a los del virus completo.
Por lo tanto, esto replica,
dones que son deficientes en propagación ya no se comportan
como un virus, y ya no podemos llamarlos virus,
sino que los llamamos replicables -los replican,
este rendía se producen en líneas celulares empaquetado horas
en las que se transfer acta el DNA que codifica el replique,
con una vez dentro de la célula;
el replican reunia, se multiplica asimismo y expresa las distintas
proteínas del virus.
Por otra parte, la célula complementa con la proteína de la envuelta,
que es la que le falta al picón, dando lugar a partículas similares
a virus o v el epes que contienen en el interior.
El genoma del replico, asociado a la núcleo proteína
y que actúan como vehículos de estos replico unes para administrarlos
a los individuos vacunados en el interior de la célula
de este individuo vacunado, los replican es de remedia,
van a copiarse a sí mismos, van a auto replicarse,
van a amplificar la dosis antigénicas,
es decir, van a expresar todos los antígenos virales,
formando unas estructuras que son muy similares
a las del virus original, también antigénicas mente,
porque incluyen la proteína, ese y otras proteínas virales,
lo que permite dar una respuesta inmune muy potente,
pero en estas células no es expresa la proteína de la envuelta,
con lo cual las v, el epes, son deficientes en propagación,
lo que las hace muy seguras,
además de eliminar el gen de la envuelta que hemos visto
que es esencial para la propagación del virus.
Se han eliminado un conjunto de genes
que se denominan genes accesorios en coronavirus,
que no son necesarios para la replicación del virus,
pero que tienen que ver con la virulencia,
porque fundamentalmente intervienen en el antagonismo
de la respuesta inmune innata, por lo tanto,
cuando estos genes se eliminan del genoma del virus.
El virus se atenúa, induce una respuesta inmune innata
más potente y, como consecuencia,
una respuesta adaptativa también más potente, como resultado,
se han direccionado cinco genes en el coronavirus
-mers, gen de la envuelta y los cuatro genes accesorios 3,
cuatro a cuatro cinco que dan lugar a replican, es muy seguros,
porque no propagan y además, no tienen genes de virulencia
y con una gran potencia se han auto réplica activos.
Esto significa que podemos utilizar una dosis de rne a más pequeña,
porque dentro de la célula se va amplificar a sí mismo y expresa,
además, múltiples antígenos virales;
por supuesto, la proteína de la especula,
pero también otras proteínas virales
que darán lugar a una inmunidad más completa,
más equilibrada y más duradera,
más parecida a la que se observa en una infección natural.
Se evalúa en modelos animales.
En ratones,
humanizados que estos replicables estaban atenuados
y en estos experimentos consisten en administrar;
los replico, anes intranets, realmente, a los ratones.
Se observa que mientras que el virus completo da signos de enfermedad,
que se miren fundamentalmente como pérdida de peso del ratón
y termina produciéndose la muerte de todos los ratones
en aquellos animales a los que se administraron
los republicanes a los que les faltaba gen,
de la envuelta o los genes accesorios o la combinación de los cinco genes,
se observó en todas estas líneas
coloreadas que los animales no mostraban enfermedad,
es decir, no perdían pesa y todos ellos sobrevivían,
lo que confirmaba que el candidato a vacuna
es seguro y no hace daño a los animales,
se confirmó también in vivo, que estos replican es errónea,
se replican en los pulmones de ratón,
como muestran las columnas de color naranja
que corresponden a un replican al que le faltan cinco genes virales,
vemos que los niveles de producción de rm a viral al mediante replicación
que da lugar al genoma del virus o mediante transcripción
que da lugar a los mensajeros virales,
estos niveles siguen siendo elevados aunque, como era de esperar,
son más bajos que los que se obtienen con la infección
de un virus completo.
Por tanto, el candidato a vacuna se auto réplica
y con dosis más bajas, que tienen un menor coste,
se puede conseguir una eficacia similar.
Se demostró que el replican al que le faltan los cinco genes
es deficiente en propagación en los pulmones de ratón
y se observa en las columnas de color naranja
que no es posible recuperar virus incentivo de los pulmones de ratón,
mientras que el virus completo crece eficientemente
y produce millones de partículas de virus infectiva.
Por lo tanto, el candidato a vacuna no se propagan,
tiene un comportamiento autolimitado,
lo que lo hace muy seguro, y, por último, se ensayó.
La protección que estos replican es de rm,
a podían dar como vacunas en ratones humanizados
para ello se hizo una inmunización intranet sal
con una única dosis y 21 días.
Después de la inmunización, se dio,
se hizo un desafío con una dosis letal,
de forma que en los animales que no se habían inmunizado
y esta es la línea de color gris,
los animales no estaban protegidos y, por tanto,
el virus del desafío causaba una pérdida de peso severa,
y la muerte del 100 por 100 de los animales.
Sin embargo, en los animales que se habían inmunizado con el replico han
son las líneas de color después del desafío,
los animales no perdían peso, no daban signos de enfermedad
y todos ellos sobrevivían;
por lo tanto, los replicó en ese remedar.
Dan una protección del 100 por 100 frente a la enfermedad
y frente a la muerte.
Además la inmunidad que confieren estos este replican de del virus
es una inmunidad esterilizante.
Esto significa que en los pulmones de los ratones que se han inmunizado
no es posible recuperar virus del desafío
como muestran las columnas de color naranja,
mientras que en aquellos animales no inmunizados el virus del desafío
crece eficientemente, por lo tanto, los replican es de mers;
están protegiendo frente a la infección impide
que el virus del desafío infecte las células,
se replique y con ello evitan los contagios
y la transmisión del virus.
Esta inmunidad esterilizante está asociada a la administración,
intranet sal de la vacuna, que induce en las cosas respiratorias.
Una inmunidad en cosas que permite proteger
frente a la infección mediante anticuerpos,
que se expresan en la misma puerta de entrada del virus
y también protege frente a la enfermedad;
por lo tanto, impide la replicación del virus y la transmisión.
Por el contrario, la vacunación intramuscular,
induce una inmunidad sistémica, que llega muy bien a los pulmones
y que, por tanto, protege de la enfermedad
y de la muerte
pero que no llega también a las vías respiratorias superiores,
con lo cual no impide que el virus empiece la infección,
y pueda replicarse y transmitirse a otros individuos.
Siguiendo una estrategia similar a la descrita para mers.
Estamos desarrollando en el laboratorio
un replico annex herreña frente al sars coronavirus 2.
Se ha generado un ceden efectivo en el que se han hecho
una colección de mutantes de de elección y la elección
combinada de genes necesarios para la propagación
y para la virulencia da lugar a réplica honest errónea,
que son competentes en replicación y de eficientes.
En propagación.
Estos replican es r mía,
pueden administrarse siguiendo dos estrategias.
Una de ellas,
similar a la escrita para mers mediante partículas similares
a virus que se producen en líneas celulares,
empaquetadas en las que se introduce adn con la información del replico,
on el replico, anse auto,
replica y expresa proteínas, virales,
mientras que la célula empaquetado-
hora proporciona en trans las proteínas que faltan
en el replico y que son esenciales para la propagación de forma
que tenemos partículas análogas a virus que contienen
el replico han de errónea
pero que no tienen capacidad de propagarse cuando no están presentes
las proteínas esenciales para la propagación.
Otra forma alternativa de producirlo es mediante síntesis química,
en la que el rne ha se transcribe in vitro
y se combina con polímeros sintéticos para dar lugar a nanopartículas,
que actúan como vehículos para la administración del errónea
en el interior de las células.
Nuestro objetivo es el desarrollo de vacunas,
que se administren, intranets al mente para proporcionar
inmunidad esterilizante.
Sin embargo, esta forma de administración,
que no es la convencional,
requiere de un desarrollo más avanzado para demostrar la seguridad
y la eficacia de esta forma de administrarlo,
por lo que en paralelo a este desarrollo de vacunas
se está ensayando también la administración.
Intramuscular que es una forma más convencional y administración
y, por tanto, más sencilla de conseguir
una autorización por parte de las agencias reguladoras.
Aunque se dispone de vacunas muy efectivas en el mundo real
para proteger frente a la enfermedad causada por el coronavirus 2,
todavía hay algunos desafíos en el desarrollo de vacunas,
mejoras por una parte, mejorar la eficacia;
las vacunas actuales solo
reducen parcialmente la transmisión del virus,
por lo tanto, para conseguir una inmunidad esterilizante
sería necesario incorporar cambios en nuevas vacunas,
aparecen constantemente variantes que escapen
a la inmunidad que dan las vacunas y sería conveniente desarrollar
vacunas que expresan múltiples antígenos virales,
no solo la proteína de las circula de forma
que la inmunidad que proporcionan es más resistente
a las variaciones que experimenta el virus, sobre todo en la proteína.
Ese, la duración de la inmunidad es todavía una incógnita
posiblemente sea necesaria la vacunación especialmente
de las personas vulnerables,
para mantener el nivel de protección,
y de ahí la necesidad de disponer de estrategias alternativas
de vacunación.
Precisamente, el colectivo más vulnerable a la infección por ser
estos son las personas mayores que tienen el problema
de la Inmaculada senescencia, es decir,
una respuesta inmune, menos eficaz,
lo que requeriría el desarrollo de vacunas específicas
para personas mayores que funcionen con la máxima eficiencia.
En estos individuos
y, por último, el requerimiento de la vacunación universal,
de forma que hasta que todo el mundo esté vacunado
no vamos a conseguir una, una protección en el mundo.
Por lo tanto, disponer de distintas alternativas
de vacunas que estén a disposición del mundo entero
sigue siendo un desafío para vencer a la pandemia lo antes posible.
Muchas gracias por vuestra atención.